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可能很多从事免疫学研究的FLOWER研究重点不会在粒细胞家族上面，但作为免疫系统的一部分，粒细胞在主动防御上还是有着重要的作用，而且，实际上，在网站里面，还是时不时可以看到相关提问，但是大家对于用什么标记、如何分析会比较合理，仍然存在疑问。所以，这里引用《Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies.》一文中的图形，给做人和小鼠的中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞的朋友们参考。

中性粒、嗜酸粒、嗜碱粒常用的标记及其表型

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2018-2-27 20:46 上传

人类中性粒、嗜酸粒、嗜碱粒细胞的分析设门

排除碎片、粘连体等设门在此不详述了，在排除掉这些干扰之后，用CD45/CD11b，选出双阳性的髓系细胞（下图左上小图），接着用CD15/CD16散点图显示这些细胞，可见以下群体：

（1）CD15＋CD16＋的细胞，就是中性粒细胞（蓝色）。

（2）CD15＋CD16－的细胞中，大部分是Siglec-8＋CCR3＋，就是嗜酸粒细胞（绿色）。

（3）CD15－CD16－细胞中，FcεRIα＋CCR3＋者，就是嗜碱粒细胞（红色）。

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2018-2-27 20:46 上传

小鼠中性粒、嗜酸粒、嗜碱粒细胞的分析设门

排除碎片、粘连体如前，选择CD45＋细胞，接着用Ly6C/CD11b散点图分析，可见以下群体：

（1）CD11b+/Ly6int群体，进一步分析其Ly6G表达，Ly6G＋部分就是中性粒（蓝色）。

（2）CD11b+/LyCneg-low部分，进一步用Siglec-F和CD200R3分析，其中Siglec-F＋CD200R3－CCR3＋部分，就是嗜酸粒细胞（绿色），Siglec-F－CD200R3＋CD49b＋部分，就是嗜碱粒细胞（红色）。

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参考文献：

Cossarizza A, Chang HD, Radbruch A, et al. Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies. Eur J Immunol. 2017 Oct;47(10):1584-1797.